用薄層色譜掃描儀對薄層上被分離的物質(zhì)進(jìn)行直接定量的方法稱為薄層色譜掃描法。目前各國生產(chǎn)的薄層色譜儀規(guī)格不同，性能各異，但其基本測定原理是一樣的，即用一束長寬可以調(diào)節(jié)的一定波長、一定強(qiáng)度的光照射到薄層斑點(diǎn)上進(jìn)行整個斑點(diǎn)的掃描，用儀器測量通過斑點(diǎn)或被斑點(diǎn)反射的光束強(qiáng)度的變化從而達(dá)到定量的目的。
    (1)薄層板制備除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.2～0.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
    (2)點(diǎn)樣除另有規(guī)定外，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時必須注意勿損傷薄層表面。
    (3)展開展開缸如需預(yù)先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封缸的蓋，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開劑中),密封缸蓋,待展開規(guī)定距離(一般為10～15cm),取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測。
    (4)如需用薄層掃描儀對色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。